本發(fā)明公開(kāi)了一種柑桔衰退病毒侵染性克隆的構(gòu)建方法,步驟:(1)三個(gè)覆蓋CTV基因組全長(zhǎng)特異片段CTV1、CTV2、CTV3的長(zhǎng)鏈RT?PCR擴(kuò)增;(2)三元穿梭載體pCY線性化;(3)TAR克?。翰捎么姿徜囖D(zhuǎn)化法將CTV1、CTV2、CTV3回收片段和線性化的三元穿梭載體pCY共轉(zhuǎn)化酵母菌YPH501;(4)轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌;(5)農(nóng)桿菌介導(dǎo)接種,從而鑒定獲得CTV侵染性克隆。還公開(kāi)了侵染性克隆的接種方法:(1)播種:柑桔種子剝?nèi)ネ夥N皮播于培養(yǎng)基,暗培養(yǎng);2)離心收集攜帶CTV侵染性克隆與Hc?Pro或P19表達(dá)質(zhì)粒的農(nóng)桿菌細(xì)胞,用接種緩沖液懸浮;(3)真空浸潤(rùn);(4)暗培養(yǎng)。
聲明:
“柑桔衰退病毒侵染性克隆的構(gòu)建及接種方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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