權(quán)利要求

1.硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，包括以下步驟： （1）溶劑熱法制備Fe 3O 4納米粒子：將FeCl 3·6H 2O加入乙二醇中，攪拌均勻，依次加入聚乙二醇、醋酸鈉得到混合溶液，超聲分散20min~60min，200℃保溫10~16h，磁分離，洗滌干燥，得到Fe 3O 4納米粒子； （2）Fe 3O 4納米粒子包覆聚合物：將步驟（1）制備的Fe 3O 4納米粒子分散到pH=8.5的Tris緩沖液中，加入多巴胺單體，再加入FeCl 3·6H 2O水溶液，避光攪拌6~12h，多巴胺單體自聚，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子，得到Fe 3O 4@PDA納米粒子； （3）表面包覆SiO 2：將正硅酸乙酯、催化劑、水分散于有機(jī)溶劑中，600w超聲處理15min，形成SiO 2初級(jí)粒子溶液；Fe 3O 4@PDA納米粒子分散于超純水中，600w超聲處理1~2h，加入至SiO 2初級(jí)粒子溶液中，F(xiàn)e 3O 4納米粒子表面包覆SiO 2，合成硅羥基磁珠。2.如權(quán)利要求1所述的硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，步驟（1）中，將所述混合溶液進(jìn)行超聲分散20min~60min得到乳液；將所述乳液過(guò)濾除去未完全分散的顆粒；將所述乳液倒入聚四氟乙烯反應(yīng)釜中，于200℃保溫12h后進(jìn)行磁性分離，洗滌干燥，得到Fe 3O 4納米粒子。 3.如權(quán)利要求1所述的硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，步驟（1）中，所述Fe 3O 4納米粒子的平均粒徑為20~500nm。 4.如權(quán)利要求1所述的硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，步驟（1）中，所述聚乙二醇為聚乙二醇4000，按摩爾比，F(xiàn)eCl 3·6H 2O：聚乙二醇=18~24:1。 5.如權(quán)利要求1所述的硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，步驟（2）中，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子后，聚多巴胺的厚度≤50nm。 6.如權(quán)利要求1所述的硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，步驟（3）中，SiO 2初級(jí)粒子的平均粒徑為100～200nm。 7.如權(quán)利要求1所述的硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，步驟（3）中，所述催化劑選自氨水、乙醇胺、氫氧化鈉、氫氧化鉀中的至少一種。 8.如權(quán)利要求1所述的硅羥基磁珠的合成方法，其特征在于，步驟（3）中，所述有機(jī)溶劑選自乙二醇、甲醇、乙醇、二乙胺、丙酮中的至少一種。 9.由權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的硅羥基磁珠的合成方法制備得到的硅羥基磁珠。 10.權(quán)利要求9所述的硅羥基磁珠在提取DNA中的應(yīng)用。

說(shuō)明書(shū)

硅羥基磁珠及其合成方法、應(yīng)用

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于核酸提取領(lǐng)域，具體涉及一種硅羥基磁珠及其合成方法、應(yīng)用。

背景技術(shù)

磁珠通常指的是具有超順磁性的磁珠在磁場(chǎng)中能夠迅速聚集，離開(kāi)磁場(chǎng)后又能夠再度均勻分散，其已經(jīng)廣泛的應(yīng)用于DNA提取、免疫學(xué)檢測(cè)等領(lǐng)域。磁珠的首次被制備為具有超順磁性的聚苯乙烯微球，之后磁性微球的相關(guān)技術(shù)快速發(fā)展起來(lái)，在各類(lèi)磁珠中，二氧化硅磁珠由于其表面具有羥基而便于進(jìn)行多樣性修飾，已經(jīng)成為了DNA提取領(lǐng)域最常用的磁珠形式。

目前，常見(jiàn)的硅羥基磁珠制備方法為Stober法，具體是在Fe 3O 4納米顆粒表面修飾一層納米SiO 2，但是該方法存在Fe 3O 4納米顆粒包覆的SiO 2層粒徑不均一或包覆不均勻，且有容易團(tuán)聚的缺陷。

而現(xiàn)有的Fe 3O 4納米顆粒表面包覆SiO 2的方法也存在一些問(wèn)題，如下：

1.常見(jiàn)的沉積法包覆的SiO 2層的厚度不一，造成了磁珠的粒徑差異大，導(dǎo)致后續(xù)在提取DNA時(shí)的提取效率受到了較大的影響；

2.堿性條件下非常不穩(wěn)定；

3.硅膠自身結(jié)構(gòu)空隙較多，容易造成表面大量的水存積，增加了化學(xué)反應(yīng)的復(fù)雜性；

4. 存在較大的非特異性吸附性。

因此，尋找一種核酸提取效率高，粒徑均勻，F(xiàn)e 3O 4納米顆粒表面包覆率高的硅羥基磁珠是當(dāng)前領(lǐng)域亟待解決的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種硅羥基磁珠的合成方法及其應(yīng)用；本發(fā)明對(duì)硅羥基磁珠的合成方法改進(jìn)點(diǎn)之一在于，將Fe 3O 4納米粒子與SiO 2粒子層之間以聚多巴胺作為結(jié)合層，使Fe 3O 4納米粒子更致密的連接SiO 2初級(jí)粒子，減少了結(jié)構(gòu)空隙，避免了水存積；其次，本發(fā)明的第二個(gè)改進(jìn)點(diǎn)為將SiO 2初級(jí)粒子先進(jìn)行超聲分散，加入包覆聚合物的Fe 3O 4納米粒子，相比沉積法，本發(fā)明利用聚多巴胺的自粘附性，吸附性的結(jié)合SiO 2初級(jí)粒子，使Fe 3O 4納米粒子表面更均勻包覆一層SiO 2初級(jí)粒子，同時(shí)聚多巴胺表面豐富的活性官能團(tuán)有利于提高對(duì)核酸的吸附效率。

具體的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種硅羥基磁珠的合成方法，包括以下步驟：

（1）溶劑熱法制備Fe 3O 4納米粒子：將FeCl 3·6H 2O加入乙二醇中，攪拌均勻，依次加入聚乙二醇、醋酸鈉得到混合溶液，超聲分散20min~60min，200℃保溫8~20h，磁分離，洗滌干燥，得到Fe 3O 4納米粒子；

（2）Fe 3O 4納米粒子包覆聚合物：將步驟（1）制備的Fe 3O 4納米粒子分散到pH=8.5的Tris緩沖液中，向反應(yīng)體系中加入多巴胺單體，加入FeCl 3·6H 2O水溶液，避光攪拌6~12h，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子，得到Fe 3O 4@PDA納米粒子；

（3）表面包覆SiO 2：將正硅酸乙酯、催化劑、水分散于有機(jī)溶劑中，600w超聲處理15min，形成SiO 2初級(jí)粒子溶液；Fe 3O 4@PDA納米粒子分散于超純水中，600w超聲處理1~2h，加入至SiO 2初級(jí)粒子溶液中，F(xiàn)e 3O 4納米粒子表面包覆SiO 2，合成硅羥基磁珠。

進(jìn)一步的，步驟（1）中，將所述混合溶液進(jìn)行超聲分散20min~60min得到乳液；將所述乳液過(guò)濾除去未完全分散的顆粒；將所述乳液倒入聚四氟乙烯反應(yīng)釜中，于180℃~220℃保溫12h后進(jìn)行磁性分離，洗滌干燥，得到Fe 3O 4納米粒子。

進(jìn)一步的，步驟（1）中，所述Fe 3O 4納米粒子的平均粒徑為20~500nm。

進(jìn)一步的，步驟（1）中，所述聚乙二醇為聚乙二醇4000，按摩爾比，F(xiàn)eCl 3·6H 2O：聚乙二醇=18~24:1。

進(jìn)一步的，步驟（2）中，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子后，聚多巴胺包裹的厚度≤50nm。

進(jìn)一步的，步驟（3）中，SiO 2初級(jí)粒子的平均粒徑為100～200nm。

進(jìn)一步的，步驟（3）中，所述催化劑選自氨水、乙醇胺、氫氧化鈉、氫氧化鉀中的至少一種。

進(jìn)一步的，步驟（3）中，所述有機(jī)溶劑選自乙二醇、甲醇、乙醇、二乙胺、丙酮中的至少一種。

本發(fā)明還提供了上述一種硅羥基磁珠的合成方法制備得到的硅羥基磁珠以及所述硅羥基磁珠在提取DNA中的應(yīng)用。

本發(fā)明的有益效果在于：

1.本發(fā)明的一種硅羥基磁珠的合成方法，首先將Fe 3O 4納米粒子表面包裹一層聚多巴胺，利用聚多巴胺的自粘附性，吸附性的結(jié)合SiO 2初級(jí)粒子，在堿性條件下非常穩(wěn)定；

2.本發(fā)明的方法是將SiO 2初級(jí)粒子先行分散，這種工藝使SiO 2初級(jí)粒子的包覆率更高，更致密，減少了結(jié)構(gòu)空隙，避免了水存積；而且相比沉積法，包覆原理的改變導(dǎo)致SiO 2初級(jí)粒子的包裹厚度可以控制，制備得到的硅羥基磁珠粒徑更均勻，極大地減少了非特異性吸附性；

2.由于聚多巴胺在堿性下即可溫和自聚，硅羥基磁珠制備方便快捷，本發(fā)明的制備方法更適合大規(guī)模的合成；且聚多巴胺表面豐富的活性官能團(tuán)有利于提高對(duì)核酸的吸附效率，且相比其他聚合物，聚多巴胺具有更優(yōu)秀的生物相容性，不僅具有良好的機(jī)械強(qiáng)度，化學(xué)穩(wěn)定性也同樣優(yōu)秀。

附圖說(shuō)明

構(gòu)成本發(fā)明的一部分的說(shuō)明書(shū)附圖用來(lái)提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，本發(fā)明的示意性實(shí)施例及其說(shuō)明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的不當(dāng)限定。

圖1為本發(fā)明中Fe 3O 4納米粒子的TEM圖；

圖2為本發(fā)明中Fe 3O 4@PDA納米粒子的TEM圖。

具體實(shí)施方式

下面通過(guò)具體的實(shí)施方案敘述本發(fā)明。除非特別說(shuō)明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實(shí)施方案應(yīng)理解為說(shuō)明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書(shū)所限定。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明實(shí)質(zhì)和范圍的前提下，對(duì)這些實(shí)施方案中的物料成分和用量進(jìn)行的各種改變或改動(dòng)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，一種硅羥基磁珠的合成方法，包括以下步驟：

（1）溶劑熱法制備Fe 3O 4納米粒子：將FeCl 3·6H 2O加入乙二醇中，攪拌均勻，依次加入聚乙二醇、醋酸鈉得到混合溶液，混合溶液進(jìn)行超聲分散20min~60min得到乳液；將所述乳液過(guò)濾除去未完全分散的顆粒；將所述乳液倒入聚四氟乙烯反應(yīng)釜中，于160℃~240℃保溫12h后進(jìn)行磁性分離，洗滌干燥，得到Fe 3O 4納米粒子；

（2）Fe 3O 4納米粒子包覆聚合物：將步驟（1）制備的Fe 3O 4納米粒子分散到pH=8.5的Tris緩沖液中，向反應(yīng)體系中加入多巴胺單體，加入微量的FeCl 3·6H 2O水溶液，避光攪拌6~12h，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子，得到Fe 3O 4@PDA納米粒子；加入微量Fe 3+使其與聚多巴胺的螯合作用加強(qiáng)，有利于聚多巴胺的包覆，通過(guò)控制多巴胺的自聚時(shí)間，可以控制聚多巴胺層的厚度，為了防止過(guò)厚的聚多巴胺影響后續(xù)吸附SiO 2，本發(fā)明的實(shí)施例優(yōu)選反應(yīng)時(shí)間6~8h，更優(yōu)選7h；

（3）表面包覆SiO 2：將正硅酸乙酯、催化劑、水分散于有機(jī)溶劑中，600w超聲處理15min，形成SiO 2初級(jí)粒子溶液；Fe 3O 4@PDA納米粒子分散于超純水中，600w超聲處理1~2h，加入至SiO 2初級(jí)粒子溶液中，F(xiàn)e 3O 4納米粒子表面包覆SiO 2，合成硅羥基磁珠。

優(yōu)選的，步驟（1）中，所述Fe 3O 4納米粒子的平均粒徑為20~500nm，更優(yōu)選的，F(xiàn)e 3O 4納米粒子的平均粒徑20~100nm。

優(yōu)選的，步驟（1）中，所述聚乙二醇為聚乙二醇4000，按摩爾比，F(xiàn)eCl 3·6H 2O：聚乙二醇=18~24:1。

優(yōu)選的，步驟（2）中，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子后，聚多巴胺包裹的厚度≤50nm，更優(yōu)選的聚多巴胺包裹的厚度≤40nm。

優(yōu)選的，步驟（3）中，SiO 2初級(jí)粒子的平均粒徑為100~200nm。

優(yōu)選的，步驟（3）中，所述催化劑包括但不限于氨水、乙醇胺、氫氧化鈉、氫氧化鉀中的至少一種，更優(yōu)選，所述催化劑為氨水。

優(yōu)選的，步驟（3）中，所述有機(jī)溶劑包括但不限于乙二醇、甲醇、乙醇、二乙胺、丙酮中的至少一種，更優(yōu)選的，有機(jī)溶劑為乙醇。

在溶劑熱中添加聚乙二醇合成Fe 3O 4納米粒子，一步完成Fe 3O 4納米粒子的合成以及對(duì)其表面改性。工藝操作簡(jiǎn)單，得到的Fe 3O 4納米粒子粒徑均一，分散性好，不易團(tuán)聚，利于后續(xù)反應(yīng)。

采用超聲輔助合成硅羥基磁珠，讓其前驅(qū)體先在特定體系中水解形成SiO 2初級(jí)粒子，再加入Fe 3O 4@PDA納米粒子分散液進(jìn)行超聲，經(jīng)過(guò)保溫、洗滌，即可得到硅羥基磁珠。工藝操作簡(jiǎn)單，反應(yīng)時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于機(jī)械攪拌的方式，得到的硅羥基磁珠分散性好，不易團(tuán)聚，磁性好，提高了產(chǎn)品質(zhì)量和反應(yīng)時(shí)間。

采用超聲輔助合成的硅羥基磁珠在病毒核酸提取過(guò)程中也表現(xiàn)出了良好的性能，磁珠無(wú)殘留，對(duì)核酸吸附性好。

實(shí)施例1

1.將3.37 g FeCl 3·6H 2O放入盛有100 ml乙二醇的聚四氟乙烯內(nèi)膽中，超聲攪拌使其完全溶解形成均勻分散液，將2.5 g聚乙二醇4000、9 g乙酸鈉依次加入分散液中600 w超聲攪拌120 min，后放入反應(yīng)釜中，在200 ℃保溫12h后取出；將反應(yīng)釜冷卻至室溫，先用磁鐵分離出黑色沉淀，去除上層溶液，后用無(wú)水乙醇洗滌3次，再用超純水洗滌3次，放入鼓風(fēng)干燥箱進(jìn)行干燥。

2.將2gFe 3O 4納米粒子分散到200mL pH=8.5的Tris緩沖液（10mmol/L），向反應(yīng)體系中加入0.5g多巴胺單體，加入1.2mg/L的FeCl 3·6H 2O水溶液，避光攪拌8h，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子，聚多巴胺層的厚度為30±2nm，得到Fe 3O 4@PDA納米粒子，乙醇洗滌3次，真空干燥；

3.將2 ml超純水、3.4 ml氨水、0.6 ml正硅酸乙酯依次加入盛有100 ml無(wú)水乙醇的體系中，600 w超聲處理15 min，形成SiO 2初級(jí)粒子；

4.稱(chēng)取1 g合成的Fe 3O 4@PDA納米粒子粉末，分散于2ml超純水中，將其加入步驟3的反應(yīng)體系中，600 w超聲處理2h，利用由擴(kuò)散控制的聚集成核機(jī)理對(duì)Fe 3O 4@PDA納米粒子進(jìn)行表面SiO 2的包覆，合成硅羥基磁珠。

實(shí)施例2

1.將2 g FeCl 3·6H 2O放入盛有80 ml丙酮的聚四氟乙烯內(nèi)膽中，超聲攪拌使其完全溶解形成均勻分散液，將2.5 g聚乙二醇4000、7 g乙酸鈉依次加入分散液中600 w超聲攪拌30 min，后放入反應(yīng)釜中，在200℃保溫16 h后取出；將反應(yīng)釜冷卻至室溫，先用磁鐵分離出黑色沉淀，去除上層溶液，后用無(wú)水乙醇洗滌3次，再用超純水洗滌3次，放入鼓風(fēng)干燥箱進(jìn)行干燥。

2.將2gFe 3O 4納米粒子分散到200mL pH=8.5的Tris緩沖液（10mmol/L），向反應(yīng)體系中加入0.5g多巴胺單體，加入1.2mg/L的FeCl 3·6H 2O水溶液，避光攪拌8h，聚多巴胺包裹Fe 3O 4納米粒子，得到Fe 3O 4@PDA納米粒子，乙醇洗滌3次，真空干燥；

3.將2 ml超純水、3.4 ml乙醇胺、0.6 ml正硅酸乙酯依次加入盛有100 ml無(wú)水乙醇的體系中，600 w超聲處理120 min，形成SiO 2初級(jí)粒子；

4.稱(chēng)取1 g合成的Fe 3O 4@PDA納米粒子粉末，分散于2ml超純水中，將其加入步驟3的反應(yīng)體系中，600 w超聲處理2h，利用由擴(kuò)散控制的聚集成核機(jī)理對(duì)Fe 3O 4@PDA納米粒子進(jìn)行表面SiO 2的包覆，合成硅羥基磁珠。

實(shí)施例3

將合成的Fe 3O 4@PDA納米粒子和硅羥基磁珠分別通過(guò)TEM觀察其納米顆粒的形貌和尺寸。

從圖1可以看出Fe 3O 4納米粒子本身為球形，粒徑在30~100nm，圖2為Fe 3O 4@PDA納米粒子粒徑在80~200nm，這表明在Tris溶液存在下加入多巴胺單體，在Fe 3O 4表面包覆一層聚多巴胺膜，膜的厚度約為20~30nm，相同條件包覆兩層聚多巴胺（即反應(yīng)時(shí)間增加4h），膜的厚度約為30~40nm，相同條件包覆三層聚多巴胺膜（即反應(yīng)時(shí)間增加8h），膜的厚度約為40~50nm，聚多巴胺吸附劑，吸附SiO 2初級(jí)納米粒子在聚多巴胺表面，隨著聚多巴胺膜的厚度增加，表面吸附的SiO 2初級(jí)納米粒子數(shù)量相對(duì)的增加；進(jìn)一步表明了本發(fā)明硅羥基磁珠的成功制備，也表示本發(fā)明的方法能夠精準(zhǔn)的控制硅羥基磁珠的大小，有利于提高檢測(cè)試劑盒的穩(wěn)定性和精準(zhǔn)度。

從圖1和圖2中可以看出，顆粒分布均勻，在包覆了聚多巴胺之后，納米粒子的厚度明顯增加，這證明聚多巴胺的成功包覆。

實(shí)施例4

本實(shí)施例使用一種核酸提取試劑盒，進(jìn)行DNA提取實(shí)驗(yàn)，所述核酸提取試劑盒的配方如下：

裂解液：3%吐溫20

蛋白酶K溶液：10mg/ml的蛋白酶K，50mM Tris-HCl，10mM CaCl2，PH為7.5

洗滌液1：20mM Tris，甘露醇2%

洗滌液2：10mM Tris

洗脫液：無(wú)DNase/RNase水

磁珠懸液：本發(fā)明實(shí)施例1制備的磁珠50mg/ml，包含于含0.5-1mM的IDHA的10mMPBS溶液中

將實(shí)施例1制備的硅羥基磁珠用于病毒DNA提取，實(shí)驗(yàn)步驟如下：

本發(fā)明所有試劑均使用1%DEPC處理的超純水配制，所有耗材均無(wú)DNA/RNA 酶污染。

1.取樣：將采樣管中裂解15min的采集樣本加入到預(yù)分裝的96深孔板中，陰性樣本只加200ul采集樣本，陽(yáng)性樣本加150ul采集樣本和50ul陽(yáng)性質(zhì)控品。

2.試劑預(yù)分裝：按以下表格預(yù)分裝試劑：

3.磁分離試劑中的磁珠為本發(fā)明實(shí)施例1制備的硅羥基磁珠。

表1孔位組分及用量

分別添加200ul樣本和20ul蛋白酶k溶液到A1~H1/ A7~H7孔中，5個(gè)重復(fù)，使用博科生產(chǎn)核酸提取儀。提取程序如下：

表2 核酸提取儀步驟

提取完成后，取A5~H5/ A11~H11相應(yīng)孔位的洗脫液得到基因組DNA。

按照核酸提取試劑盒說(shuō)明書(shū)相關(guān)說(shuō)明進(jìn)行相應(yīng)操作提取，提取后的基因組DNA吸取到1.5ml離心管中備用。

用1.5%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，瓊脂糖購(gòu)自全式金 （貨號(hào)GS201-01），熒光核酸染色試劑購(gòu)自全式金（貨號(hào)GS101-01），Marker，購(gòu)自全式金 （貨號(hào)BM311-01），電壓200V，電流150mA，運(yùn)行45min。

按照核酸檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）說(shuō)明書(shū)來(lái)進(jìn)行PCR反應(yīng)體系的配制，加入體系的比例為：

表3組分用量

然后在PCR反應(yīng)管中加入13ul反應(yīng)體系，從核酸提取完成后的離心管中分別取陽(yáng)性和陰性各7ul，終體積為20ul/管，然后蓋緊管蓋，振蕩器振蕩，離心機(jī)離心，按照順序放入PCR儀中，按照下列條件進(jìn)行反應(yīng)：

表4PCR儀檢測(cè)步驟

將PCR儀的各項(xiàng)參數(shù)按上表進(jìn)行設(shè)置，設(shè)置完成后按照順序?qū)CR管放入PCR儀中，開(kāi)始運(yùn)行。

PCR結(jié)果判讀

表5PCR儀檢測(cè)結(jié)果

實(shí)施例5

將3.37g FeCl 3·6H 2O放入盛有100 ml乙二醇的聚四氟乙烯內(nèi)膽中，超聲攪拌使其完全溶解形成均勻分散液，將2.5 g聚乙二醇4000、9 g乙酸鈉依次加入分散液中600 w超聲攪拌30 min、1h、1.5h、2h、2.5h、3h。

本實(shí)施例為驗(yàn)證超聲時(shí)間對(duì)磁珠吸附核酸能力的影響，做了以下單因素實(shí)驗(yàn)（其余步驟同實(shí)施例1）：

按實(shí)施例4的檢測(cè)方法，檢測(cè)濃度6250cp/ml的50ul陽(yáng)性質(zhì)控品，檢測(cè)結(jié)果如表3所示（表中1+：超聲時(shí)間30 min；2+：超聲時(shí)間1 h；3+：超聲時(shí)間1.5 h；4+：超聲時(shí)間2 h；5+：超聲時(shí)間2.5 h；6+：超聲時(shí)間3 h）。

表6 不同超聲時(shí)間合成的硅羥基磁珠PCR數(shù)據(jù)

以上數(shù)據(jù)顯示，超聲2h合成的硅羥基磁珠效果最好，因此上述實(shí)施例均采用2h超聲時(shí)間合成。

實(shí)施例6

將本發(fā)明實(shí)施例1的硅羥基磁珠同購(gòu)買(mǎi)磁珠（常州天地人和生物科技有限公司MagSilica Beads 100ml(50mg/ml)）作對(duì)比試驗(yàn)，如下：

1+和2+均是購(gòu)買(mǎi)的磁珠，3和4均是用本發(fā)明實(shí)施例1方法制備的硅羥基磁珠，按照實(shí)施例4的檢測(cè)方法，得到了表7中的兩種磁珠的PCR實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：

表7 不同硅羥基磁珠的PCR數(shù)據(jù)

上述數(shù)據(jù)顯示，按照實(shí)施例1合成的硅羥基磁珠與購(gòu)買(mǎi)的磁珠在核酸提取試劑盒中體現(xiàn)的性能幾乎相差無(wú)幾，本實(shí)施例1制備的硅羥基磁珠效果滿(mǎn)足試劑盒檢測(cè)要求。

實(shí)施例7

本實(shí)施例使用實(shí)施例2制備的硅羥基磁珠進(jìn)行不同批次間的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)比，其中樣本1+、2+、3+分別是不同批次間的硅羥基磁珠

表8 不同批次間合成的硅羥基磁珠的PCR數(shù)據(jù)

以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果表明本發(fā)明合成的硅羥基磁珠具有優(yōu)異的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

硅羥基磁珠及其合成方法、應(yīng)用.PDF