本發(fā)明提供一種基于α螺旋把手提高蛋白核酸生物耦合效率的方法;首先設(shè)計(jì)攜帶非天然氨基酸的把手H?tag,其次構(gòu)建含有H?tag和待測(cè)蛋白的融合重組表達(dá)質(zhì)粒,再次表達(dá)純化在H?tag中含有非天然氨基酸的融合重組蛋白,最后對(duì)融合蛋白H?tag中非天然氨基酸和核酸底物上的耦合基團(tuán)進(jìn)行高效點(diǎn)擊化學(xué)連接。本方法使用α螺旋把手為非天然氨基酸提供可控的蛋白表面反應(yīng)條件,避免待測(cè)蛋白表面復(fù)雜的結(jié)構(gòu)、電荷和極性納米環(huán)境,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白與核酸進(jìn)行高效點(diǎn)擊化學(xué)連接等目標(biāo)。
聲明:
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