組織金屬蛋白酶抑制因子siRNA表達(dá)載體的構(gòu)建及肝硬化治療應(yīng)用,本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明根據(jù)siRNA的設(shè)計(jì)原理,分別選擇TIMP-1和TIMP-2編碼區(qū)的核苷酸序列,設(shè)計(jì)相應(yīng)的siRNA序列,進(jìn)行BLAST比較,避免與其他基因同源,化學(xué)合成單鏈寡核苷酸,體外經(jīng)退火形成雙鏈DNA,與真核表達(dá)載體pGeneil-1連接,酶切鑒定和序列測定分析表明成功構(gòu)建了TIMP-1和TIMP-2的siRNA表達(dá)載體,該載體經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染肝星狀細(xì)胞(HSC),能明顯抑制TIMP-1和TIMP-2的表達(dá);上述表達(dá)載體,通過肝硬化動(dòng)物模型驗(yàn)證,能明顯地降低肝組織的膠原纖維沉積,可望成為一種新型的抗肝纖維化的基因療法應(yīng)用到臨床治療中。
聲明:
“組織金屬蛋白酶抑制因子siRNA表達(dá)載體的構(gòu)建及肝硬化治療應(yīng)用” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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