本發(fā)明涉及單個(gè)分子成像，或單個(gè)分子的一個(gè)或多個(gè)集合，以及與成像相關(guān)的方法。在方法方面，本發(fā)明提供了單分子成像的方法。該方法包括以下步驟：a)將測(cè)試樣品暴露給探針，其中所述探針包含特異結(jié)合至靶分子的第一部分，以及因與以一個(gè)或多個(gè)波長(zhǎng)的光相互作用的一個(gè)或多個(gè)化學(xué)基團(tuán)而可檢測(cè)的第二部分，其中所述探針與靶分子結(jié)合，形成復(fù)合物；b)將復(fù)合物暴露給與所述一個(gè)或多個(gè)化學(xué)基團(tuán)相互作用的光的一個(gè)或多個(gè)波長(zhǎng)，及；c)與所述一個(gè)或多個(gè)化學(xué)基團(tuán)相互作用的光，檢測(cè)與其一個(gè)或多個(gè)波長(zhǎng)相互作用而形成的結(jié)果，生成一個(gè)或多個(gè)單分子的影像。該影像在至少1×105平方微米的成像區(qū)域上具有高于450納米的分辨率，且其中影像通過(guò)一個(gè)單一檢測(cè)步驟便可得到，而無(wú)需改變?nèi)魏螜z測(cè)設(shè)置。