本發(fā)明公開了檢測由Hela細(xì)胞引起的細(xì)胞交叉污染的方法及引物，包括A組引物對(duì)和B組引物對(duì)，所述方法為：1）以待檢細(xì)胞培養(yǎng)物上清液作為第一輪PCR模板，以Hela細(xì)胞純培養(yǎng)的上清液作為PCR陽性對(duì)照，用A組引物對(duì)進(jìn)行第一輪PCR；2）以第一輪PCR產(chǎn)物作為第二輪PCR模板，用B組引物對(duì)進(jìn)行第二輪PCR；3）瓊脂糖凝膠電泳檢測第二輪PCR產(chǎn)物，判斷待檢細(xì)胞是否被Hela細(xì)胞污染。本發(fā)明耗時(shí)短、成本低，靈敏度高，傳統(tǒng)的STR鑒定法靈敏度低，在作為污染源的細(xì)胞數(shù)量低于總細(xì)胞數(shù)量的10%時(shí)，STR無法檢測到細(xì)胞污染，而本發(fā)明靈敏度提高到了1%，是STR的10倍。本發(fā)明無需提取核酸，無需破壞細(xì)胞，可以直接檢測，是“無損無創(chuàng)”的檢測方法。