本發(fā)明提供了一種利用顛茄托品酮還原酶(tropinonereductase,TR)I型(TR-I)基因提高顛茄莨菪烷類生物堿含量的方法。涉及包含目的基因TR-I基因的克??;攜帶TR-I基因的植物高效表達載體的構(gòu)建;攜帶TR-I基因的植物表達載體對顛茄的遺傳轉(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)基因顛茄的獲得與檢測。其過程是用高保真RT-PCR分離目的基因,構(gòu)建攜帶目的基因的植物高效表達載體,采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)把目的基因?qū)腩嵡迅咝П磉_,打破顛茄中莨菪烷類生物堿生物合成途徑中的限速反應(yīng),推動代謝流往目標產(chǎn)物方向流動,提高顛茄中莨菪烷類生物堿的產(chǎn)量;在特定的篩選和誘導條件下獲得轉(zhuǎn)基因的顛茄;并對轉(zhuǎn)基因顛茄進行分子檢測和化學檢測,最終獲得莨菪烷類生物堿含量大大提高的轉(zhuǎn)基因顛茄。本發(fā)明能提高顛茄莨菪烷類生物堿含量。
聲明:
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