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基因重組的大腸桿菌及其在發(fā)酵制備蕓苔素內酯中的應用

1039 編輯：管理員來源：中冶有色技術網

2023-03-19 07:31:09

本發(fā)明為基因重組的大腸桿菌及其在發(fā)酵制備蕓苔素內酯上的應用，解決了化學合成工藝復雜，環(huán)境污染大的問題。提取油菜植株各器官的總RNA，經逆轉錄和PCR技術得到CYP90B1、CYP90C1、CYP85A2三個基因的PCR產物，將PCR產物分別克隆到pGEM?Teasy載體，測序分析得到正確的基因序列。含目的基因的克隆載體經相應的內切酶酶切后連接到表達載體pET?28a(+)上，測序分析得到三種重組的表達載體，三種重組表達載體同時轉化同一目標菌大腸桿菌BL21(DE3)，經篩選得到可以同時表達三個蛋白的大腸桿菌BL21(DE3)?BL。大腸桿菌BL21(DE3)?BL菌液接種到添加了底物麥角甾醇、甲羥戊酸和誘導物的發(fā)酵培養(yǎng)基中，調節(jié)發(fā)酵參數，補料進行連續(xù)發(fā)酵。發(fā)酵液用乙酸乙酯提取結晶或過層析柱制得蕓苔素內酯。

聲明：

“基因重組的大腸桿菌及其在發(fā)酵制備蕓苔素內酯中的應用” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究，如用于商業(yè)用途，請聯系該技術所有人。

我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)