本發(fā)明公開了一種以葡萄糖氧化酶功能化的金納米粒子為探針的電致化學(xué)發(fā)光生物傳感器構(gòu)建方法及其在蛋白質(zhì)激酶活性檢測和抑制劑篩選中的應(yīng)用，屬于電致化學(xué)發(fā)光領(lǐng)域。將生物素標(biāo)記的DNA和GOx共軛修飾到AuNPs表面制備多功能納米探針GOx/AuNPs/DNA；在蛋白質(zhì)激酶A和三磷酸腺苷的作用下，修飾于電極表面的多肽發(fā)生磷酸化，通過抗原-抗體的特異性識別作用，將生物素標(biāo)記的抗磷酸化絲氨酸抗體結(jié)合到多肽的磷酸化位點(diǎn)上；再利用親和素對生物素反應(yīng)的介導(dǎo)作用，將GOx/AuNPs/DNA捕獲到電極表面。蛋白質(zhì)激酶A的濃度越大，多肽修飾電極表面產(chǎn)生的磷酸化位點(diǎn)越多，組裝于傳感界面的GOx就越多，GOx催化葡萄糖產(chǎn)生的H2O2越多，魯米諾的發(fā)光越強(qiáng)，實(shí)現(xiàn)了對蛋白質(zhì)激酶A的高靈敏檢測。