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重組人甲狀旁腺激素在大腸桿菌中的構(gòu)建、表達(dá)與純化方法

723   編輯:管理員   來源:中冶有色技術(shù)網(wǎng)  
2023-03-19 08:56:59
本發(fā)明涉及醫(yī)藥生物工程技術(shù)領(lǐng)域,是包括涉及 編碼人甲狀旁腺激素小肽的cDNA,和利用其表達(dá)載體制備人 甲狀旁腺激素的方法。本發(fā)明將化學(xué)合成的重組人甲狀旁腺激 素(1-34)基因用PCR擴(kuò)增后,克隆至表達(dá)載體pET-35b(+), 使重組人甲狀旁腺激素(1-34)融合于纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (CBDclos)的羧基端,并得到高效 表達(dá)。融合蛋白經(jīng)纖維素樹脂親和層析純化后,經(jīng)Factor Xa 裂解釋放出rhPTH(1-34),再通過纖維素樹脂親和層析、C4 反向高效液相色譜純化得到rhPTH(1-34)純品。每升培養(yǎng)液可 獲取3mg高純度的rhPTH(1-34)。經(jīng)質(zhì)譜測(cè)定,所得樣品的 分子量為4117.0道爾頓,與rhPTH(1-34)理論分子量一致。 本發(fā)明極大程度上豐富了該多肽在醫(yī)藥生物工程技術(shù)領(lǐng)域的 研究和開發(fā)。
聲明:
“重組人甲狀旁腺激素在大腸桿菌中的構(gòu)建、表達(dá)與純化方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
我是此專利(論文)的發(fā)明人(作者)
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