一種利用枯草芽孢桿菌表達(dá)重組胰高血糖素樣肽?1的方法。首先化學(xué)合成得到含有BamHⅠ/XbaⅠ酶切位點(diǎn)及His?tag標(biāo)簽的重組胰高血糖素樣肽?1目的基因片段,插入帶有SamyQ信號(hào)肽序列的pHT43載體質(zhì)粒中,經(jīng)大腸桿菌DH5α擴(kuò)增后,篩選陽性克隆,經(jīng)過測序驗(yàn)證后,將測序正確的質(zhì)粒大量抽提,經(jīng)過電轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入枯草芽孢桿菌WB800N宿主中,培養(yǎng)并且經(jīng)過1mM?IPTG誘導(dǎo)表達(dá)后,發(fā)酵液上清經(jīng)過Tricine–SDS?PAGE及Western?Blot方法證明重組胰高血糖素樣肽?1(hmGLP?1)的重組蛋白成功獲得表達(dá)。本發(fā)明通過重組胰高血糖素樣肽?1基因?qū)肽c道益生菌枯草芽孢桿菌中,使之成為能夠表達(dá)其蛋白的重組菌,為后續(xù)制備活菌制劑和進(jìn)行動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。
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“利用枯草芽孢桿菌表達(dá)重組胰高血糖素樣肽-1的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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