本發(fā)明公開了一種調(diào)控根瘤衰老的半胱氨酸蛋白酶基因及制備方法和應用,該方法利用紫云英已知的半胱氨酸蛋白酶基因比對日本百脈根基因組序列庫,在網(wǎng)上進行詳細分析比對后以起始密碼子為起點,終止密碼子為終點設計特異性強的引物進行基因克隆,克隆的片段經(jīng)過測序分析及比對分析,證實本發(fā)明成功的從百脈根基因組和cDNA中克隆出了調(diào)控根瘤衰老的半胱氨酸蛋白酶基因。半胱氨酸蛋白酶基因在豆科植物上中的應用,利用組織化學定位技術研究了該基因啟動子的表達模式,該基因在根瘤衰老過程中的功能。結果表明,與對照植株比較,RNAi植株根瘤變大,固氮酶活增高,根瘤延遲衰老,根瘤有效固氮時間延長,植株生長更加健壯,在豆科作物上具有應用前景。
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