本發(fā)明屬于生物化學領域,涉及一種檢測細胞內蛋白質降解的方法,包括步驟:(1)利用甲硫氨酸類似物將細胞內新合成的蛋白質的甲硫氨酸標記上疊氮小分子基團,(2)在不同的時間點裂解細胞,通過CuAAC反應將特定的可被識別的分子偶聯(lián)在蛋白質的疊氮小分子基團上,(3)在反應體系中直接利用均相時間分辨熒光共振原理(HTRF)對偶聯(lián)了步驟(2)中可被識別的分子的目標蛋白進行定量,從而確定目標蛋白的降解速率。本方法無需同位素或細胞毒素的蛋白質降解測量新方法,并達到了與高通量篩選兼容,可用于醫(yī)藥產業(yè)界篩選疾病蛋白降解相關藥物,以及學術界對特定蛋白降解相關信號通路的篩選等。
聲明:
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