本發(fā)明涉及生物分子檢測方法,特別是一種用已知抗體定量檢測相應(yīng)抗原的夾心免疫檢測方法,是將捕獲抗體直接或間接包被在聚苯乙烯板的微孔,形成夾心發(fā)光免疫復(fù)合體,用熒光酶標(biāo)儀激發(fā)并檢測所形成的捕獲抗體—抗原—檢測抗體三層夾心發(fā)光免疫復(fù)合物的熒光強(qiáng)度,通過與標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)比求出待測抗原的濃度,所述的檢測抗體是用上轉(zhuǎn)換納米晶標(biāo)記的抗待測抗原的單克隆抗體,選用發(fā)射不同光的上轉(zhuǎn)換納米晶標(biāo)記針對(duì)不同抗原的抗體可同時(shí)檢測同一樣品中的多種抗原。具有狹窄的熒光譜峰,發(fā)射光譜可調(diào),對(duì)化學(xué)物質(zhì)和生理代謝的降解有很強(qiáng)的抵抗力,光漂白域值高、熒光背景低。克服了以往的夾心免疫檢測法顯色單一,在多種待測物同時(shí)檢測方面存在的局限性。
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