本發(fā)明公開了一種基于高精度質(zhì)譜的蛋白類泛素化修飾位點檢測方法及應(yīng)用,所述蛋白類泛素化修飾位點檢測方法包括以下步驟:步驟S1:構(gòu)建獲得體外SUMO化修飾反應(yīng)體系,以獲得目標蛋白;步驟S2:對步驟S1所獲得的目標蛋白進行胰蛋白酶酶切,獲得酶切后的多肽肽段;步驟S3:將步驟S2獲得的多肽通過液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析采集得到多肽質(zhì)譜數(shù)據(jù),經(jīng)數(shù)據(jù)解析,得到修飾位點以及核心肽段的序列;步驟S4:化學合成含有SUMO化修飾位點的同位素標記肽段序列,采用PRM方法進行位點確證,確定一套母?子離子對;步驟S5:用步驟S4建立的母?子離子對對內(nèi)源修飾位點進行檢測;所述SUMO化修飾是指SUMO1類泛素化修飾。
聲明:
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