本發(fā)明提供了一種溫度可控的電化學(xué)DNA生物傳感器及其制備方法。將與一段目標(biāo)DNA序列互補(bǔ)的巰基化的單鏈DNA固定在金絲熱電極表面作為捕獲探針，與目標(biāo)DNA互補(bǔ)以后，形成帶有3’平端的雙鏈結(jié)構(gòu)，誘導(dǎo)外切酶III從雙鏈結(jié)構(gòu)的3’平端由3’端向5’端對(duì)捕獲探針消解，目標(biāo)DNA被釋放，并與其他捕獲探針進(jìn)行新的雜交切酶循環(huán)，最終電極表面捕獲探針數(shù)量明顯減少。酶切循環(huán)過(guò)程前后電極表面捕獲探針對(duì)檢測(cè)液中三氯化六氨合釕的電化學(xué)吸附信號(hào)的減少程度與DNA濃度對(duì)數(shù)成線性關(guān)系，即可實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)DNA的檢測(cè)。本發(fā)明提供的檢測(cè)方法對(duì)目標(biāo)DNA的檢測(cè)具有檢測(cè)時(shí)間短，靈敏度高，檢測(cè)線低，選擇性好的特點(diǎn)。