本發(fā)明公開(kāi)了一種基于DNA兩面性電化學(xué)傳感器構(gòu)建方法及其端粒酶活性檢測(cè)應(yīng)用。在端粒酶存在時(shí)，端粒酶引物發(fā)生延伸的產(chǎn)物與發(fā)夾DNA雜交形成雙鏈，核酸外切酶III將該雙鏈中發(fā)夾DNA與端粒酶延伸產(chǎn)物雜交部分的單核苷酸逐個(gè)剪切出來(lái)，同時(shí)釋放出端粒酶引物延伸產(chǎn)物和富含A堿基的短DNA單鏈，釋放出來(lái)的端粒酶延伸產(chǎn)物可再次與發(fā)夾DNA雜交并被核酸外切酶III剪切，從而形成循環(huán)釋放更多的富含A堿基的短DNA單鏈，而富含A堿基的短DNA單鏈可通過(guò)A堿基與金的相互作用修飾到金電極上，該短DNA單鏈的磷酸基團(tuán)可吸附CeO₂?TiO₂復(fù)合納米棒，從而增加了電極表面的空間位阻及對(duì)[Fe(CN)₆]^3?/4?的靜電排斥，減弱了[Fe(CN)₆]^3?/4?的電化學(xué)信號(hào)，根據(jù)電化學(xué)信號(hào)的大小可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞中端粒酶活性的靈敏檢測(cè)。