本發(fā)明涉及一種納米晶石墨納米孔檢測芯片及其制備方法和應用，屬于芯片制備技術領域。本發(fā)明提供了一種納米晶石墨納米孔檢測芯片，以帶有納米孔的納米晶石墨薄膜為核心。由于納米晶石墨薄膜表面易于修飾的化學特性，有助于為納米孔傳感提供更高的分辨率和靈敏度，從而在檢測DNA、RNA、多肽或蛋白的過程中，待測物在電解質(zhì)溶液中通過電場驅(qū)動通過納米晶石墨薄膜上的納米孔，進而達到檢測的目的。本發(fā)明還提供了一種納米晶石墨納米孔檢測芯片的制備方法，通過對支撐基片加工形成開孔，然后在支撐基片上制備具有納米孔的納米晶石墨薄膜。本發(fā)明的制備方法簡單，容易操作。