本發(fā)明提供一系列用于選擇性檢測細胞內(nèi)超氧陰離子自由基的新型熒光探針及合成方法和用途。按照縮合劑∶芳香族鄰氨基硫酚或芳香族鄰氨基硫酚衍生物=1∶2-3.5重量份配比將縮合劑、芳香族鄰氨基硫酚或芳香族鄰氨基硫酚衍生物溶解于正丁醇∶苯=1∶0.3-0.6體積份配比的混合溶液中,得混合液;再將該混合液加熱回流3-5小時,減壓除去溶劑,得到熒光探針粗品;然后將該粗品用乙醇重結晶,真空干燥得熒光探針純品。該熒光探針用于化學體系,生物體系中超氧陰離子自由基的檢測,生物活細胞和活組織內(nèi)的超氧陰離子自由基的熒光成像檢測,以及臨床醫(yī)學上病變組織中超氧陰離子自由基的檢測。