本發(fā)明公開了一種采用大豆過氧化物酶偶聯(lián)蛋白分子制備生物探針的方法，包括如下步驟：步驟一、利用氧化劑氧化大豆過氧化物酶中的糖苷鍵；步驟二、將蛋白與步驟一得到的大豆過氧化物酶反應(yīng)形成希夫氏堿，形成穩(wěn)定的酶-蛋白分子；步驟三、提純步驟二得到的酶-蛋白分子，得到所述生物探針。本發(fā)明使用大豆過氧化物酶代替現(xiàn)有技術(shù)中的HRP作為標記酶制備生物探針，一方面此酶的熱穩(wěn)定性比HRP高，發(fā)光信號比HRP強，可以持續(xù)較長時間的強化學(xué)發(fā)光，檢測靈敏度能夠獲得大大提高。其次，本發(fā)明制備的五種生物探針，可用于多項蛋白的檢測，同時由于大豆過氧化物酶原料來源廣，價格低廉，其產(chǎn)業(yè)化研究具有廣泛的應(yīng)用前景和重要的意義。