本發(fā)明公開了一種檢測手性氨基酸濃度的方法及其試劑盒，所述方法包括以下步驟：1）在待檢樣品中加入D-氨基酸氧化酶或者L-氨基酸氧化酶進行酶催化反應；2）在步驟1）所得的反應液中依次加入緩沖液、魯米諾、辣根過氧化物酶進行化學發(fā)光反應；3）測定步驟2）所得的反應液的發(fā)光強度。本發(fā)明可以用于對映體中其中的一種手性氨基酸的測定。本方法不受對映體中另一種手性氨基酸的干擾，也不受常見金屬離子的干擾。本方法操作十分簡單、且靈敏度高，可以檢測對映體中手性氨基酸的含量。