本發(fā)明公開了一種用于定量檢測單個活細菌粘附行為的原位測試系統和測試方法，所述測試系統包括電磁屏蔽箱、電化學工作站、計算機、設于電磁屏蔽箱內的減震臺、以及設于減震臺上的原子力顯微鏡和光學倒置顯微鏡；所述的原子力顯微鏡包括AFM基盤和AFM掃描器。采樣本發(fā)明的系統和方法可以實現在細菌真實的生理代謝過程中定量檢測單個活細菌在材料表面的粘附行為(包括細菌和材料表面粘附力、膜外蛋白生物大分子鏈長度、平均展開事件次數、平均展開力)，并同時獲得單個活細菌和材料之間電子轉移信號。