本發(fā)明屬于化學(xué)分析檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于比率定量檢測內(nèi)源性過氧化氫的近紅外熒光探針及其制備方法、應(yīng)用。該近紅外熒光探針的結(jié)構(gòu)式為：。本發(fā)明用于比率檢測過氧化氫，在過氧化氫存在下對應(yīng)的熒光波長發(fā)生明顯位移，可用于外源性以及內(nèi)源性過氧化氫的檢測和定量，并可大大降低外部檢測條件的干擾，提高檢測精度。此發(fā)明比率檢測過氧化氫熒光探針的這類化合物，在過氧化氫存在時，紫外吸收亦發(fā)生明顯變化，可同時用紫外分光光度計及肉眼進行檢測。這類化合物作為熒光探針可用于細胞內(nèi)外過氧化氫水平的檢測，這對深入研究過氧化氫在細胞有絲分裂過程中尤其是在研究過氧化氫充當(dāng)信使分子的功能具有十分重要的指導(dǎo)意義。