本發(fā)明提供了一種免清洗通用型ELISA熒光免疫探針及其制備方法和應用，其特征在于，通過HBTU/DIEA偶聯(lián)反應，將羧基苯硼酸修飾到g?C₃N₄上，后經(jīng)超聲剝離，可得到弱熒光的硼酸修飾的石墨相氮化碳納米片(BCNNS)，再將抗體(Ab)標記到BCNNS上，可得到強熒光的Ab?BCNNS復合材料(ON)，隨著目標抗原的加入，Ab?BCNNS復合材料的熒光發(fā)生猝滅現(xiàn)象(OFF)，基于這種ON?OFF現(xiàn)象，即可實現(xiàn)對目標抗原的特異性檢測；而且通過改變Ab?BCNNS中的標記抗體，即可實現(xiàn)對不同目標抗原的選擇性檢測。