本發(fā)明公開(kāi)了一種細(xì)菌檢測(cè)膜和制備方法及其細(xì)菌檢測(cè)的方法，屬于生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。該細(xì)菌檢測(cè)膜包括基材層及設(shè)置在基材層上的檢測(cè)層，基材層由納米纖維膜組成，檢測(cè)層由具備顯色功能的陽(yáng)離子聚合物和陰離子聚合物組成，具備顯色功能的陽(yáng)離子聚合物和陰離子聚合物通過(guò)層層自組裝的方式均勻交替組裝設(shè)置在納米纖維膜表面。本發(fā)明的細(xì)菌檢測(cè)膜可在5分鐘內(nèi)快速的實(shí)現(xiàn)細(xì)菌的定性及精確定量測(cè)定，檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，因此，本發(fā)明的檢測(cè)膜在環(huán)境、食品和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域都具備較好的應(yīng)用。