一種固定化木質素過氧化物酶的制備方法及應用，制備方法包括以下步驟：（1）通過三氯化鐵、檸檬酸鈉和醋酸鈉制備四氧化三鐵納米粒子；（2）制備磁性二氧化硅納米粒子；（3）制備多巴胺聚合包埋磁性二氧化硅納米粒子；（4）通過多巴胺聚合原位包埋制備磁性二氧化硅固定化木質素過氧化物酶；向含有機污染物的廢水中加入上述方法制備的固定化木質素過氧化物酶及過氧化氫，室溫下反應，以去除有機污染物。本發(fā)明制備工藝簡便，采用的固定化載體是納米級顆粒，安全無毒害，穩(wěn)定性好，比表面積大，與酶的結合率高，在催化體系中的分散性較好，對污染物的去除效率更高，無二次污染的風險，該固定化載體可以通過磁性分離回收重復利用固定化酶。