核苷三磷酸(NTP)參與磷酸化反應(yīng),其中磷酸基團(tuán)通過激酶從NTP轉(zhuǎn)移到底物上。在激酶反應(yīng)中提供的NTP的γ磷酸結(jié)合于電活性標(biāo)記,導(dǎo)致該γ磷酸-電活性標(biāo)記結(jié)合物從NTP轉(zhuǎn)移到底物。電活性標(biāo)記是一種有機(jī)部分,如醌或硝基雜環(huán),或者是一種金屬茂,如二茂鐵或二茂鈷。一旦γ磷酸-電活性標(biāo)記結(jié)合物通過激酶轉(zhuǎn)移到電極結(jié)合的底物,磷酸化的發(fā)生就通過循環(huán)伏安法進(jìn)行電化學(xué)檢測。磷酸化也能夠通過對攜帶了結(jié)合電活性標(biāo)記的γ磷酸的底物進(jìn)行質(zhì)譜分析來檢測。含有γ磷酸-電活性標(biāo)記結(jié)合物的NTP適用于檢測樣品中激酶存在的方法,篩選調(diào)節(jié)激酶活性的候選化合物的方法,以及適用于診斷與激酶相關(guān)的疾病的方法。