本發(fā)明公開了一種比率型端粒酶活性定量檢測方法，該方法為：首先，在發(fā)夾DNA探針5’末端標(biāo)記亞甲基藍、在3’末端標(biāo)記巰基，再通過金?巰鍵自組裝在金電極表面；然后將5’端標(biāo)記有二茂鐵的TS引物與金電極表面的發(fā)夾DNA探針雜交，將得到的修飾有發(fā)夾DNA探針的金電極用于端粒酶檢測。本發(fā)明是同時利用兩個電化學(xué)探針進行端粒酶活性檢測，構(gòu)建出一種新型的比率型電化學(xué)生物傳感器，顯著提高了檢測靈敏度，并克服了現(xiàn)有技術(shù)重復(fù)性差、穩(wěn)定性差等存在的問題；本發(fā)明通過端粒酶催化產(chǎn)生的重復(fù)序列與探針序列互補，增強了檢測特異性；本發(fā)明的方法簡便易行，具有靈敏度高、快速準(zhǔn)確、成本低的特點。