本發(fā)明屬于分析化學領域，具體涉及一種分離測定阿伐斯汀中間體Z3中基因毒性雜質(zhì)的方法。本發(fā)明方法采用的色譜柱是十八烷基鍵合硅膠為填料，采用緩沖鹽溶液、有機溶液進行梯度洗脫，將阿伐斯汀中間體Z3中基因毒性雜質(zhì)進行分離檢測；檢測波長為270±5nm；流速為每分鐘0.9～1.1ml；柱溫為30±2℃。本發(fā)明方法采用高靈敏度、高耐用性色譜方法，可在24分鐘內(nèi)將基因毒性雜質(zhì)和可能轉化為含基因毒性結構的雜質(zhì)與供試品主峰及供試品中可能存在的其他13個已知雜質(zhì)很好分離，提供了現(xiàn)有技術未能解決的基因毒性雜質(zhì)的分離測定問題；本分析方法時間短、靈敏度高、專屬性強、重現(xiàn)性好、操作簡單可行。