本發(fā)明公開(kāi)了一種基于三維納米多孔金修飾硼摻雜金剛石電極的電化學(xué)生物傳感器的制備及應(yīng)用，具體涉及一種硼摻雜金剛石電極制備，乙酰膽堿酯酶的固定及在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用。要解決的技術(shù)問(wèn)題是硼摻雜金剛石薄膜電極電催化活性低、表面再造困難、選擇性及靈敏性較差。本發(fā)明包括以下步驟：①在硼摻雜金剛石電極上制備三維納米多孔金并修飾硼摻雜金剛石電極；②將步驟①經(jīng)過(guò)修飾的三維納米多孔金修飾硼摻雜金剛石電極固定乙酰膽堿酯酶構(gòu)建成電化學(xué)生物傳感器。采用這樣的技術(shù)方案后的本發(fā)明用于固定乙酰膽堿酯酶，并用于有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的電化學(xué)檢測(cè)，可增加比表面積，促進(jìn)電子轉(zhuǎn)移，提高電催化活性，提高檢測(cè)的靈敏度。