本發(fā)明公開一種化學(xué)發(fā)光水凝膠微珠的制備方法，涉及發(fā)光材料和化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明包括以下步驟：(1)將殼聚糖溶解在醋酸溶液中；(2)將化學(xué)發(fā)光催化劑、化學(xué)發(fā)光試劑、金納米溶膠與步驟(1)的殼聚糖凝膠溶液混合；得到水凝膠微珠前驅(qū)體凝膠溶液；(3)將水凝膠微珠前驅(qū)體凝膠溶液注入強(qiáng)堿溶液中，形成水凝膠微珠，沖洗后，干燥，即獲得化學(xué)發(fā)光水凝膠微珠。本發(fā)明還提供上述方法制得的化學(xué)發(fā)光水凝膠微珠及應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)為：化學(xué)發(fā)光水凝膠微珠表面含金納米，可通過化學(xué)發(fā)光水凝膠微珠上的金納米直接固載抗體，制備化學(xué)發(fā)光免疫分析探針。制備方法簡單、快捷、結(jié)合效果好，無需繁瑣的多步交聯(lián)反應(yīng)。