本發(fā)明提供一種同時檢測兩種循環(huán)miRNA的可視化檢測方法及檢測探針，所述方法包括以下步驟：步驟1、制備金納米粒子；步驟2、制備金納米粒子?底物DNA鏈HP復合物HP@AuNPs，與酶鏈A、B組合構成AuNPs?DNA步行器檢測探針；步驟3、將靶標miRNA與檢測探針進行信號放大反應；步驟4、基于化學發(fā)光進行靶標miRNA可視化檢測。本發(fā)明的檢測探針能夠實現(xiàn)對多個含有兩種不同循環(huán)miRNA的樣品的同時定量檢測，檢測結果互不受干擾。本發(fā)明提供的檢測方法通過手機拍照的方式記錄化學發(fā)光信號，而不需要昂貴儀器，有助于降低成本，簡化檢測操作，能夠實現(xiàn)對miRNA的即時檢測。