本發(fā)明涉及一種二甲基異茨醇單克隆抗體的制備及其酶聯(lián)免疫吸附分析方法，屬于免疫化學(xué)及分析生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供二甲基異茨醇單克隆抗體的制備方法，該方法包括以下步驟：先合成二甲基異茨醇修飾物，再制備2?MIB修飾物?BSA和2?MIB修飾物?OVA，再利用2?MIB修飾物?BSA和2?MIB修飾物?OVA制備二甲基異茨醇單克隆抗體。本發(fā)明是以分子結(jié)構(gòu)與2?MIB相似的樟腦作為半抗原修飾的起始物，將樟腦修飾后合成2?MIB的修飾物，使修飾物不僅保留了2?MIB完整的分子結(jié)構(gòu)，而且引入帶有端基為羧基的連接臂；通過格氏試劑進(jìn)攻羰基，接著將雙鍵氧化生成羧基，最后利用衍生物的羧基與載體蛋白相連，即制備成免疫原和包被原，降低了生產(chǎn)成本。同時(shí)以雜交瘤技術(shù)成功制備抗2?MIB的單克隆抗體；建立了檢測2?MIB的間接競爭ELISA，靈敏度（IC₅₀值）為52.61 ng/mL。