本發(fā)明屬于固廢資源化領(lǐng)域，具體涉及一種低溫厭氧發(fā)酵菌劑的制備方法及用途。所述方法包括制備菌劑A，所述菌劑A由包含缺陷短波單胞菌(Brevundimonas?diminuta)、嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌(Stenotrophomonas?maltophilia)和銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa)的菌種混合而成。本發(fā)明方法制備的低溫厭氧發(fā)酵菌劑，利用耐低溫菌群在溫度較低時(shí)無(wú)需加熱而分解生活垃圾有機(jī)質(zhì)，縮短厭氧發(fā)酵前期啟動(dòng)時(shí)間，減少了能耗。