本發(fā)明公開了一種有機無機復(fù)合熒光微球制備方法，其特征在于包括如下步驟：（1）以正硅酸乙酯和N?(β?氨乙基?γ?氨丙基)甲基二甲氧基硅烷(AEAPMDS)為原料，以乙醇為介質(zhì)，通過氨水催化水解和凝聚制備出單分散改性二氧化硅微球；（2）用檸檬酸和二氯亞砜制備出檸檬酰氯；（3）改性二氧化硅微球和檸檬酰氯反應(yīng)制備出熒光微球；利用本發(fā)明所提供的方法制得的熒光微球的粒徑在120~250nm范圍內(nèi),其粒徑均一、大小可控、熒光效率高、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定在生物檢測和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中具有潛在的應(yīng)用價值。