本發(fā)明公開了一種分離與克隆差異表達(dá)功能基因未知序列的方法，采用多孔板或磁性微珠為載體，每個(gè)孔底部或磁株直接聯(lián)接以化學(xué)合成方法連接多聚核糖核苷酸(PolydT)，比較細(xì)胞差異表達(dá)基因分析，采用Total？RNA或mRNA加逆轉(zhuǎn)錄酶與緩沖液與PolydT在位合成cDNA，加熱變性除去mRNA，然后再與進(jìn)行比較分析的細(xì)胞Total？RNA或mRNA雜交的方法，從而實(shí)現(xiàn)差異表達(dá)基因的分離與克隆，本方法綜合了基因差減雜交方法與mRNA差異顯示(DD)技術(shù)的原理，可以實(shí)現(xiàn)差異基因表達(dá)分析與克隆未知序列基因的技術(shù)芯片化。