本發(fā)明公開了一種以蛋白質(zhì)分泌功能為靶的抗耐藥性化合物篩選方法。針對目前臨床上急需克服各種耐藥菌的藥物,本發(fā)明采用產(chǎn)生抗生素分解或鈍化酶的耐藥菌作指示菌,首先在含指示菌和對該指示菌臨界生長濃度抗生素的瓊脂培養(yǎng)基平板上篩選出蛋白質(zhì)分泌減量劑和抗生素分解或鈍化酶抑制劑;然后在含有抗生素、抗生素分解或鈍化酶和對抗生素敏感的同種指示菌瓊脂培養(yǎng)基平板上檢測出抗生素分解或鈍化酶的抑制劑,從而獲得蛋白質(zhì)分泌減量劑。蛋白質(zhì)分泌減量劑可同多種抗生素混合用于殺滅多種抗生素耐藥菌。本發(fā)明可用于從化學合成物庫、天然產(chǎn)物庫(微生物發(fā)酵物、中草藥和海洋生物提取物)中篩選蛋白質(zhì)分泌減量劑,具有操作簡便、樣品用量小和篩選通量高等優(yōu)點。