本發(fā)明為基因重組的畢赤酵母及其在發(fā)酵制備蕓苔素內(nèi)酯中的應用，解決了化學合成蕓苔素內(nèi)酯反應過程需強氧化劑及還原劑參與，工藝復雜，環(huán)境污染大的問題。提取油菜植株各器官的總RNA，經(jīng)逆轉錄和PCR技術得到CYP90B1、CYP90C1、CYP85A2三個基因的PCR產(chǎn)物，將PCR產(chǎn)物分別克隆到pGEM?Teasy載體，測序分析得到正確的基因序列。含目的基因的克隆載體經(jīng)相應的內(nèi)切酶酶切后連接到表達載體pPICZα?A上，測序分析得到三種重組的表達載體，三種重組表達載體同時轉化同一目標菌畢赤酵母X33，拉丁文名：Pichia?pastoris，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期：2017年5月27日，保藏編號：CGMCC?No.14204。