本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及黃蛭益腎膠囊指紋圖譜測(cè)定方法及其應(yīng)用。本發(fā)明提供一種黃蛭益腎膠囊指紋圖譜測(cè)定方法，利用高效液相色譜法對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，以獲得色譜圖；以及基于所述色譜圖，獲得黃蛭益腎膠囊中所含化學(xué)成分的種類和含量；色譜柱采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；以乙腈作為流動(dòng)相A，以0.05～0.1％磷酸水作為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫。該方法靈敏度和精密度高，穩(wěn)定性和重復(fù)性好，可以客觀、全面、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)黃蛭益腎膠囊質(zhì)量，對(duì)保證黃蛭益腎膠囊臨床療效具有重要意義。