本發(fā)明涉及一種殼聚糖6-OH固載環(huán)糊精衍生物的制備方法及其在H2O2檢測熒光生物傳感器中的應用，屬于高分子材料的制備與改性領(lǐng)域。本發(fā)明以鄰苯二甲酸酐保護殼聚糖2-NH2，通過點擊化學反應在其6-OH位置固載環(huán)糊精后，再以水合肼脫除殼聚糖2-NH2的保護，制得在水和部分有機溶劑中具有良好溶解性的，具有高固載率的殼聚糖6-OH定位固載環(huán)糊精衍生物。將通過本發(fā)明制得的殼聚糖6-OH固載環(huán)糊精衍生物中的環(huán)糊精疏水性空腔中固載熒光探針，殼聚糖吡喃環(huán)的2-NH2固載過氧化氫酶后，應用于對H2O2含量檢測用的熒光生物傳感器。本發(fā)明使殼聚糖6-OH固載環(huán)糊精衍生物在以酶催化作用配合熒光檢測的熒光生物傳感器中的應用成為可能。