本發(fā)明屬于生物傳感技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種單原子鈷納米酶材料、柔性電化學(xué)芯片傳感器及其應(yīng)用，所述單原子鈷納米酶材料以含鈷化合物作為鈷的前驅(qū)體，以碳納米材料作為基底，通過(guò)化學(xué)鍵合作用合成得到；所述化學(xué)鍵合作用包括π?π相互作用、酰胺鍵交聯(lián)或共價(jià)鍵結(jié)合。本發(fā)明制得的單原子鈷納米酶材料可用于構(gòu)建柔性電化學(xué)芯片傳感器，原位實(shí)時(shí)檢測(cè)活細(xì)胞及小鼠活體和器官釋放的NO；此外，該傳感器具備寬線性范圍、低檢測(cè)限、快速靈敏響應(yīng)、良好的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性以及選擇性，可以實(shí)現(xiàn)體內(nèi)及體外NO的高靈敏檢測(cè)。