本發(fā)明涉及電化學分析技術領域，具體涉及一種AchE/GQDs/N?F?TiO₂Ns光電化學生物傳感器制備方法及其應用。本發(fā)明所提供的AchE/GQDs/N?F?TiO₂Ns光電化學生物傳感器包括GQDs/N?F?TiO₂Ns和AchE，所述GQDs/N?F?TiO₂Ns包括氮氟摻雜的二氧化鈦納米管陣列(N?F?TiO₂Ns)、以及修飾在所述二氧化鈦納米管陣列上的石墨烯量子點(GQDs)；所述乙酰膽堿酯酶(AchE)交聯(lián)修飾在所述GQDs/N?F?TiO₂Ns上；所述光電化學生物傳感器的光電流響應最高的波長為365nm。所述AchE通過殼聚糖交聯(lián)修飾在所述GQDs/N?F?TiO₂Ns上。石墨烯量子點的修飾提高了光生電流強度，由于其具有良好的生物兼容性，提高了酶在電極上的固定作用，同時提高了酶與底物的親和力。本發(fā)明可以用于與乙酰膽堿及乙酰膽堿酯酶相關的檢測研究中。