本發(fā)明提供一種基于協(xié)同原位組裝G?四鏈體DNAzyme納米線的化學發(fā)光傳感器及其應用，屬于生物分析及化學發(fā)光檢測技術(shù)領域。所述化學發(fā)光傳感器至少包括三個功能性發(fā)夾探針，甲基定向內(nèi)切酶GlaI和末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶TdT。本發(fā)明設計的G?四鏈體DNAzyme納米線的協(xié)同原位組裝，用于人類基因組中CpG甲基化的一步檢測。具有操作簡單、成本低、靈敏度高、特異性好、可靠性高、通用性廣等顯著特點，為生物醫(yī)學研究、分子診斷和表觀遺傳學治療提供了一種新的檢測CpG甲基化的方法，因此具有良好的實際應用之價值。