本發(fā)明提供了一種基于石墨炔和點擊化學的銅離子的檢測方法、試劑盒以及應用；所述檢測方法包括如下步驟：(1)將石墨炔和基團修飾的雙鏈DNA的混合液中加入濃度梯度的銅離子標準溶液和還原劑，混合，反應，得到反應液，而后通過熒光光譜法測試反應液的熒光強度，根據(jù)濃度和熒光強度的關系，繪制標準曲線；(2)將石墨炔和基團修飾的雙鏈DNA的混合液中加入待測樣品溶液和還原劑，混合，反應，得到反應液，而后根據(jù)熒光光譜法測試反應液的熒光強度，根據(jù)步驟(1)得到的標準曲線定量待測樣品中銅離子的濃度；在檢測體系中選用石墨炔，能夠避免采用炔基基團進行修飾，且能大大提高檢測效率，簡化操作步驟。