本發(fā)明公開(kāi)了一種基于酶切作用的胰蛋白酶和糜蛋白酶電化學(xué)同時(shí)檢測(cè)方法，屬于電化學(xué)傳感技術(shù)領(lǐng)域。通過(guò)金-巰鍵作用將DNA-多肽復(fù)合物固定到金電極表面，再利用DNA雜交反應(yīng)捕獲DNA-金納米粒子-電子介體納米信號(hào)探針。當(dāng)靶標(biāo)蛋白酶存在時(shí)，胰蛋白酶剪切多肽上的精氨酸羧基位點(diǎn)，糜蛋白酶剪切另一條多肽上的酪氨酸羧基位點(diǎn)，使得連接于多肽上的相應(yīng)的納米信號(hào)探針脫離電極表面，導(dǎo)致相應(yīng)電子介體的峰電流下降，據(jù)此，可實(shí)現(xiàn)胰蛋白酶和糜蛋白酶的靈敏性和選擇性同時(shí)檢測(cè)。