本發(fā)明涉及一種檢測A549腫瘤細(xì)胞電化學(xué)傳感器工作電極的制備方法，該方法由對裸金電極進(jìn)行拋光處理、滴涂捕獲探針、封閉非特異性位點、滴涂燃料探針、制備Apt?T雙鏈復(fù)合物、往Apt?T雙鏈復(fù)合物中加入待測細(xì)胞液雜交、擴(kuò)增并固定H1?H2雙鏈復(fù)合物和堿性磷酸酶處理8個步驟組成，其中所述的燃料探針的序列如SEQ?ID?NO.2所示。本發(fā)明所述的方法增設(shè)了在裸金電極表面滴涂所述燃料探針的步驟，因此可實現(xiàn)雙向催化發(fā)夾自組裝反應(yīng)，顯著提高了檢測的靈敏度。