本發(fā)明公開了一種基于點擊化學的Cu2+信號放大檢測試紙條的制備方法及其應用。試紙條分別由樣品墊、膠體金墊(檢測墊和信號放大墊)、硝酸纖維膜(噴涂檢測線和質控線)以及吸水墊依次粘連在PVC襯板上。其特征在于包括所述檢測墊和信號放大墊分別噴涂有納米金識別探針1和納米金信號放大探針2，所述硝酸纖維膜上具有包被鏈霉親和素的檢測線和包被有與Cu2+誘導的點擊化學寡核苷酸互補的單鏈DNA的質控線。而藉由該試紙條可以通過直接觀察實現(xiàn)Cu2+的快速定性、半定量檢測，無需其他輔助儀器設備，本發(fā)明所提供的試紙條具有操作簡單、靈敏度高、檢測速度快、成本低等特點，適合大量樣品的篩查和現(xiàn)場監(jiān)控。