本發(fā)明涉及一種HBeAb化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒及其制備方法和應(yīng)用，所述試劑盒包括：生物素標(biāo)記的重組HBeAg工作液、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物標(biāo)記的重組HBeAg工作液、鏈霉親和素標(biāo)記的磁顆粒試劑、HBeAb校準(zhǔn)品溶液、化學(xué)發(fā)光底物液及清洗液，所述重組HBeAg為真核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的重組HBeAg。本專利試劑盒對(duì)HBeAb的檢測(cè)創(chuàng)新性地采用雙抗原夾心法模式，由HBeAg標(biāo)記生物素，先將待測(cè)樣本、生物素標(biāo)記的重組HBeAg、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物標(biāo)記的重組HBeAg反應(yīng)形成抗原?抗體?抗原夾心復(fù)合體，再加入鏈霉親和素包被的磁顆粒試劑，對(duì)HBeAb檢測(cè)的準(zhǔn)確度高，且精密性、特異性好，臨床適用性強(qiáng)。