本發(fā)明提供一種檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的電化學(xué)酶生物傳感器、制備方法及應(yīng)用，屬于電化學(xué)分析領(lǐng)域。所述電化學(xué)酶生物傳感器是由共價(jià)有機(jī)框架/多壁碳納米管復(fù)合材料與乙酰膽堿酯酶依次修飾在玻碳電極表面制備而成，其中共價(jià)有機(jī)框架/多壁碳納米管復(fù)合材料以多壁碳納米管為載體，在載體表面形成共價(jià)有機(jī)框架材料。采用三電極體系，即參比電極為銀/氯化銀電極，對(duì)電極為鉑絲電極，工作電極由共價(jià)有機(jī)框架/多壁碳納米管復(fù)合材料和乙酰膽堿酯酶依次修飾在玻碳電極表面組成，采用差分脈沖伏安法對(duì)馬拉硫磷進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明構(gòu)建的電化學(xué)酶生物傳感器具有靈敏度高、制備方法簡(jiǎn)單、選擇性高等優(yōu)點(diǎn)，在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)領(lǐng)域有很好的應(yīng)用前景及價(jià)值。