一種微孔板化學(xué)發(fā)光檢測試劑及其檢測方法，其包括發(fā)光底物液A、發(fā)光底物液B和酶結(jié)合物稀釋液；還包括20倍濃縮洗液、陰性對照和陽性對照。其檢測方法包括如下步驟：用蒸餾水或純化水將所述20倍濃縮洗液稀釋20倍，配制成工作濃度洗液，待用；取包被板條，其上布設(shè)臨界值控制品2孔，陰性對照和陽性對照各1孔，待檢血液樣品孔多個(gè)；分別加臨界值控制品、陰性對照、陽性對照、待檢血液樣品各50μl入對應(yīng)的孔中；在每個(gè)孔中分別加入所述酶結(jié)合物稀釋液50μl，然后用封板膜封好包被板條。其目的是提供一種特異性強(qiáng)，靈敏度高，獲得檢測結(jié)果的時(shí)間短，操作方式簡便，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的微孔板化學(xué)發(fā)光檢測試劑及其檢測方法。